多肽合成包括標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)多肽合成、多肽修飾、多肽文庫(kù)及重組多肽表達(dá)。序貫固相多肽合成可合成5-50aa的多肽，對(duì)于大于200aa的多肽，通過片段濃縮及連接技術(shù)合成。多肽合成儀顧名思義是用于合成多肽的裝置。由于多肽合成工藝繁瑣費(fèi)時(shí)，有需求自然有研發(fā)生產(chǎn)，這才有了多肽合成儀。
多肽合成儀以固相合成為反應(yīng)原理，在密閉防爆玻璃反應(yīng)器中按已知順序〔序列，一般為C端羧基末端至N端氨基末端〕不斷添加、反應(yīng)、合成、操作最終得到多肽載體。
多肽合成儀的合成工藝
1、樹脂選擇與氨基酸固定
合成多肽所用高分子載體主要為三種：交聯(lián)聚苯乙烯；聚酰胺；聚乙二醇脂質(zhì)樹脂。氨基酸的固定主要通過被保護(hù)氨基酸的羧基與樹脂的反應(yīng)基團(tuán)之間形成共價(jià)鍵來實(shí)現(xiàn)。
2、氨基、羧基、側(cè)鏈保護(hù)與清除
要成功合成具有特定氨基酸序列的多肽，必須保護(hù)不參與酰胺鍵形成的氨基和羧基，同時(shí)也保護(hù)氨基酸側(cè)鏈的活性基團(tuán)，反應(yīng)結(jié)束后去除保護(hù)基團(tuán)。
近年來，F(xiàn)MOC合成法得到廣泛應(yīng)用。羧基通常由形成酯基的方法保護(hù)，甲酯和乙酯是逐步合成保護(hù)羧基的常用方法。
3、縮氨酸化反應(yīng)
固相中的肽形成反應(yīng)通常是將2個(gè)對(duì)應(yīng)的氨基被保護(hù)的氨基酸和羧基被保護(hù)的氨基酸放入溶液中也不形成肽鍵，為了形成酰胺鍵，將羧基活化，混合酸酐、活性酯、酰氯
4、裂解及合成肽鏈純化
BOC法采用TFAHF裂解和脫側(cè)鏈保護(hù)基，F(xiàn)MOC法直接采用TFA，有時(shí)也采用其他堿、光降解、氟離子和析氫等脫保護(hù)方法。合成肽鏈的進(jìn)一步純化、分離和純化通常采用GX液相色譜、親和色譜、毛細(xì)管電泳等。
聯(lián)系電話
